【求助】慢病毒包装滴度上不去

　　实验中在siv的载体上我插入了一个1.3K左右的基因，然后用三种质粒共转染包装病毒。三种质粒的配比分别是 siv：pspax2：pmd2g=15ug：15ug：7ug，转染六小时后换液，每个皿约加了6mL培养基，最终48小时后收毒 约有20ml左右，然后进行病毒的滴定。因为载体中带了gfp 所有就直接取了1ml的病毒加入polybrane后滴定六孔板，分别加了1ul，10ul,50ul,100ul,500ul，然后是24小时后流式细胞仪测定gfp，其最终的结果是加了500ul的孔测定的GFP值只有15%左右，完全达不到我的后续试验的要求，是整个病毒滴度并未上去，后来使用新复苏的细胞之后，然后对三种质粒的配比进行摸索，得出来的最高的也就16%左右，现在是一筹莫展，不知道这其中哪一环节出了问题，想请问下大家有没有什么好的解决方案